(Sitometry sisan, FCM) jẹ olutupalẹ sẹẹli ti o ṣe iwọn kikankikan fluorescence ti awọn asami sẹẹli ti o ni abawọn. O jẹ imọ-ẹrọ imọ-ẹrọ giga ti o da lori itupalẹ ati tito lẹsẹsẹ awọn sẹẹli kan. O le yara wọn ati ṣe lẹtọ iwọn, eto inu, DNA, RNA, awọn ọlọjẹ, antigens ati awọn ohun-ini ti ara tabi kemikali miiran ti awọn sẹẹli, ati pe o le da lori ikojọpọ awọn isọri wọnyi.
Sitometer sisan ni akọkọ ni awọn ẹya marun wọnyi:
1 Sisan iyẹwu ati fluidics eto
2 Orisun ina lesa ati eto apẹrẹ tan ina
3 Opitika eto
4 Electronics, ibi ipamọ, àpapọ ati onínọmbà eto
5 Cell ayokuro eto
Lara wọn, itara lesa ni orisun ina ina lesa ati eto dida ina jẹ wiwọn akọkọ ti awọn ifihan agbara fluorescence ni cytometry ṣiṣan. Awọn kikankikan ti awọn simi ina ati awọn ifihan akoko ti wa ni jẹmọ si awọn kikankikan ti fluorescence ifihan agbara. Lesa jẹ orisun ina ti o ni ibamu ti o le pese gigun-ẹyọkan, agbara-giga, ati itanna iduroṣinṣin-giga. O jẹ orisun ina itara pipe lati pade awọn ibeere wọnyi.
Awọn lẹnsi iyipo meji wa laarin orisun laser ati iyẹwu sisan. Awọn lẹnsi wọnyi dojukọ tan ina lesa kan pẹlu apakan agbelebu ipin ti o jade lati orisun ina lesa sinu ina elliptical pẹlu apakan agbelebu kekere kan (22 μm × 66 μm). Agbara lesa laarin ina elliptical yii ti pin ni ibamu si pinpin deede, ni idaniloju kikankikan itanna deede fun awọn sẹẹli ti n kọja ni agbegbe wiwa laser. Ni apa keji, eto opiti naa ni awọn akojọpọ pupọ ti awọn lẹnsi, awọn iho, ati awọn asẹ, eyiti o le pin ni aijọju si awọn ẹgbẹ meji: oke ati isalẹ ti iyẹwu sisan.
Awọn opitika eto ni iwaju ti awọn sisan iyẹwu oriširiši ti a lẹnsi ati pinhole. Iṣẹ akọkọ ti lẹnsi ati pinhole (nigbagbogbo awọn lẹnsi meji ati pinhole) ni lati dojukọ tan ina lesa pẹlu ipin agbelebu ipin ti o jade nipasẹ orisun laser sinu ina elliptical pẹlu apakan agbelebu kekere kan. Eyi n pin agbara ina lesa ni ibamu si pinpin deede, ni idaniloju kikankikan itanna deede fun awọn sẹẹli kọja agbegbe wiwa laser ati idinku kikọlu lati ina ti o yana.
Awọn oriṣi akọkọ mẹta ti awọn asẹ:
1: Ajọ gigun gigun (LPF) - nikan ngbanilaaye ina pẹlu awọn gigun gigun ti o ga ju iye kan pato lati kọja.
2: Ajọ kukuru-kukuru (SPF) - nikan ngbanilaaye ina pẹlu awọn iwọn gigun ni isalẹ iye kan pato lati kọja.
3: Ajọ Bandpass (BPF) - nikan ngbanilaaye imọlẹ ni iwọn gigun kan pato lati kọja.
Awọn akojọpọ oriṣiriṣi ti awọn asẹ le ṣe itọsọna awọn ifihan agbara fluorescence ni awọn gigun gigun oriṣiriṣi si awọn ọpọn fọtomultiplier kọọkan (PMTs). Fun apẹẹrẹ, awọn asẹ fun wiwa fluorescence alawọ ewe (FITC) ni iwaju PMT jẹ LPF550 ati BPF525. Awọn asẹ ti a lo lati ṣe awari fluorescence-pupa osan (PE) ni iwaju PMT jẹ LPF600 ati BPF575. Awọn asẹ fun wiwa pupa fluorescence (CY5) ni iwaju PMT jẹ LPF650 ati BPF675.
Sitometry sisan jẹ lilo fun tito sẹẹli. Pẹlu ilọsiwaju ti imọ-ẹrọ kọnputa, idagbasoke ti ajẹsara ati ẹda ti imọ-ẹrọ antibody monoclonal, awọn ohun elo rẹ ni isedale, oogun, ile elegbogi ati awọn aaye miiran ti n pọ si ni ibigbogbo. Awọn ohun elo wọnyi pẹlu itupalẹ awọn agbara sẹẹli, apoptosis sẹẹli, titẹ sẹẹli, iwadii tumo, itupalẹ ipa oogun, ati bẹbẹ lọ.
Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Kẹsan-21-2023
